产品简介：

乐业研发的Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒，即Amplex Red Xanthine Oxidase Assay Kit，也称Amplex Red XO Assay Kit或Amplex Red XOD Assay Kit，是一种基于探针Amplex Red利用荧光或吸光度检测，快速、高灵敏地对血清、 血浆、尿液等生物体液、细胞培养上清以及组织或细胞样品中黄嘌呤氧化酶活性进行检测的试剂盒。通常0.1-1µl血清或血浆样品就足够用于本试剂盒的荧光法检测。

黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XO or XOD)是体内核酸代谢中的一种重要酶，可以催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤，并能进一步催化黄嘌呤氧化为尿酸，同时产生过氧化氢以及超氧化物阴离子的一系列氧化反应，在包括人类在内的一些物种中的嘌呤分解代谢中起着重要作用。在人类及其它灵长类动物中，XO通常存在于血清、肺、肝脏和肠黏膜中。在啮齿类动物中，XO在大部分组织中均有表达。血液中XO的活性通常都很低。当感染甲型流感时，血清及肺部的XO活性会增加。当肝功能受损时，XO会大量释放到血液中，因此检测血液中XO水平被作为一个评估严重肝损伤(例如黄疸)的灵敏指标。

本试剂盒中的Amplex Red是一种对H₂O₂高度敏感的荧光探针。在辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)存在的情况下，Amplex Red能与H₂O₂ 1:1反应，产生强烈的红色荧光物质试卤灵(Resorufin)。试卤灵的最大激发波长为571nm，最大发射波长为585nm，并且在激发波长处有很强的可见光吸收。因此本试剂盒可以用吸光度和荧光两种方法来进行检测。

本试剂盒的检测原理请参考图1。在黄嘌呤氧化酶(XO)的催化作用下，黄嘌呤(Xanthine)和氧气发生氧化反应生成尿酸(Uric acid)和H₂O₂，再通过检测H₂O₂与Amplex Red的反应产物试卤灵的荧光强度或吸光度来最终计算黄嘌呤氧化酶的酶活性。试卤灵的荧光强度和吸光度与样品中黄嘌呤氧化酶的活性成正比。

本试剂盒检测方法灵活，检测速度快。相较于黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) ，本试剂盒的检测灵敏度更高、检测方法更加灵活。本试剂盒既可以进行荧光检测，也可进行吸光度检测。整个检测过程约40分钟即可完成。

本试剂盒提供的检测裂解液有一定的通用性。使用本试剂盒中的Lysis™ Buffer A for Metabolic Assay裂解获得的细胞或组织样品，也可以用于乐业生产的其它代谢类试剂盒中同样使用Lysis™ Buffer A for Metabolic Assay进行裂解的样品检测，通用性强；而且还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些较易溶解蛋白的Western检测。

本试剂盒适用范围广。本试剂盒可用于小鼠、大鼠、人等的血清、血浆、尿液等生物体液，细胞培养上清、组织或细胞样品等的检测。本试剂盒不仅适合少量样品的检测，也非常适合高通量筛选(High-throughput screening)的自动化操作系统。

按照使用说明操作，用于96孔板检测时，本试剂盒的小包装可以进行100次检测，中包装可以进行500次检测。